周艷芝，方惠娟，鄧曉輝，張玲
(甘肅省婦幼保健院，甘肅蘭州  730050)

出版源:中國(guó)消毒學(xué)雜志 , 2017 , 34 (4) 

 二氧化氯在醫(yī)療器械領(lǐng)域二氧化氯多應(yīng)用于環(huán)境物體表面和耐腐蝕醫(yī)療器械消毒且具有較好的消毒效果，目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)二氧化氯消毒產(chǎn)品眾多,用途廣泛，選用合適的二氧化氯消毒產(chǎn)品是保證消毒效果的重要環(huán)節(jié)。本研究選擇一種二氧化氯泡騰片，對(duì)其水溶液對(duì)木質(zhì)臺(tái)面和織物的消毒效果及其安全性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室觀察。
1．1試驗(yàn)材料
試驗(yàn)用二氧化氯泡騰片為白色固體一元片劑有效氯含量為10.63％，崩解時(shí)間≤3min，溶解后為淡黃色透明溶液，有輕微氯臭味，有效氯含量100mge。L的水溶液pH值約為3.74，使用之前不用活化，直接投入規(guī)定體積純化水中，等其崩解完畢后直接使用。
試驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)菌株為金黃色葡萄球菌(ATcc—6538)和大腸桿菌(8099)，由中國(guó)普通微生物菌種保藏中心提供；SPE級(jí)ICR種小鼠(濟(jì)南鵬悅動(dòng)物繁育有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)：sYxK(魯)2014—0003號(hào))；普通級(jí)新西蘭大白兔(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，生產(chǎn)許可證號(hào)：scxK(魯)2009—0013號(hào))。
1.2試驗(yàn)菌懸液制備
按2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》的標(biāo)準(zhǔn)方法制備試驗(yàn)用細(xì)菌懸液，活菌計(jì)數(shù)以后待用。
1.3  中和劑鑒定試驗(yàn)
以配制的金黃色葡萄球菌懸液作定量殺菌試驗(yàn)程序中和劑鑒定試驗(yàn)的指標(biāo)菌載體，分為6組試驗(yàn)，重復(fù)3次。以第一組無(wú)菌或菌落數(shù)量遠(yuǎn)少于第2組，第2組菌落數(shù)比第l組多，比后幾組都少，第3、4、5各組組內(nèi)生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落數(shù)相差對(duì)比不超過(guò)15％，第6組內(nèi)培養(yǎng)完成后無(wú)菌落生長(zhǎng)，3次試驗(yàn)完成對(duì)比結(jié)果均符合上述情況，為所選中和劑適宜。
1.4定量殺菌試驗(yàn)
配制1.25倍試驗(yàn)濃度二氧化氯泡騰片溶液和菌懸液，放在20℃水浴鍋內(nèi)恒溫水浴5min。向試管內(nèi)加入恒溫水浴的4.0ml消毒液溶液(陽(yáng)性試驗(yàn)物設(shè)為同量的TPS)與1.0ml的菌懸液，震蕩并計(jì)時(shí)。作用一定時(shí)問(wèn)，將0.5ml恒溫過(guò)后的菌液混合液加入到含4.5ml中和劑試管內(nèi)，混勻，中和10min，進(jìn)行平板接種，活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)，計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值。試驗(yàn)重復(fù)3次。
1.5物體表面消毒現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn) 
選擇醫(yī)院辦公用木質(zhì)桌面為檢測(cè)對(duì)象，標(biāo)定面積5cm×5cm正方形區(qū)域2塊，其中一個(gè)供消毒處理之前的自然菌樣采集，另外一個(gè)供經(jīng)100mg／L濃度樣品溶液涂擦消毒后的菌樣采集。采集和稀釋培養(yǎng)方法依照《消毒技術(shù)規(guī)范》2.1.2.10，平行試驗(yàn)30組。觀察記錄試驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)行木質(zhì)表面消毒現(xiàn)場(chǎng)效果評(píng)定。
1.6織物消毒模擬現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)
將滅菌白色布片滴染0.01ml菌液后，放置37℃恒溫箱干燥；然后將菌片放人小布袋中，每袋放入3個(gè)菌片，分別將10個(gè)放有菌片的小布袋放入5件白色工作服的左右口袋內(nèi)。將準(zhǔn)備好的白色工作服浸入規(guī)定濃度消毒液中，作用30min，反應(yīng)10min。陽(yáng)性對(duì)照組為將放有3片干燥染菌布片的小布袋放人無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)硬水中，進(jìn)行無(wú)菌中和反應(yīng)10min；同一批次的培養(yǎng)基作為陰性組。
1.7毒性試驗(yàn)
1.7.1急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)試驗(yàn)時(shí)取二氧化氯泡騰片。SPE級(jí)IcR種小鼠各25只隨機(jī)分成雌雄各一半的5組，每組10只。采用霍恩氏法，設(shè)受試物為5個(gè)劑量，分別為1 000、2 150、4 640、10 000、21 500 mg,／(kg.bw)體重(分別取受試物2 000、4 300、9 280、20 000、43 000。mg加去離子水均至40m1)，小鼠體重19.5～21.1g，將受試物給動(dòng)物灌胃，灌胃量以小鼠重量按比例0.2 ml／／10 g計(jì)算。動(dòng)物試驗(yàn)前禁食過(guò)夜。染毒后，隨時(shí)注意動(dòng)物一般狀態(tài)和異常情況，觀察期限為14d。記錄試驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算后進(jìn)行結(jié)果評(píng)定。
試驗(yàn)時(shí)取576.7mg樣品溶于10(】mI純化水中制取消毒劑溶液。選用sPE級(jí)IcR種小鼠20只，雌雄各半，采用較大限量法，設(shè)受試物5000mg／(kg.bw)體重(5000mg／20m1)。小鼠體重18～22g，將受試物給動(dòng)物灌胃，灌胃量以小鼠重量按比例0.2ml/10g計(jì)算。動(dòng)物試驗(yàn)前禁食過(guò)夜。染毒后，隨時(shí)注意動(dòng)物一般狀態(tài)，其他異常情況，觀察期限為14 d。記錄試驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算后進(jìn)行結(jié)果評(píng)定。
1.7.2一次完整皮膚刺激試驗(yàn)取576.7mg樣品溶于100ml純化水中制取溶液。普通級(jí)新西蘭大白兔3只，體重2.7～3.0kg，室溫23℃，相對(duì)濕度53％。試驗(yàn)前一天將家兔背部脊柱兩側(cè)左右各約3cm×3cm毛剪掉。試驗(yàn)時(shí)，采用自身對(duì)照法，取0.5ml樣品溶液涂在右側(cè)暴露皮膚上，左側(cè)處理去毛皮膚涂等量純化水作對(duì)照試驗(yàn)，均用一層斑貼紙覆蓋其上，固定，涂抹后4h用純化水清洗。除去涂抹物后1h、1d、2d整時(shí)間記錄試驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》中的表2.11、表2.12進(jìn)行結(jié)果評(píng)測(cè)。
1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    將原始檢測(cè)記錄數(shù)據(jù)導(dǎo)人Excel表格，然后對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和描述性分析。
2  結(jié)果
  2.1  中和劑鑒定結(jié)果
在20～21℃條件下，含2.5∥L的硫代硫酸。鈉、0.25∥L卵磷脂和5∥L吐溫80的PBS可有效中和二氧化氯泡騰片溶液殘留對(duì)金黃色葡萄球菌的殺滅作用，對(duì)試驗(yàn)菌以及培養(yǎng)基無(wú)明顯影響，符合中和劑要求(表1)。
2.2定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)表明，此二氧化氯泡騰片溶液濃度為100mg／L時(shí)，作用一定時(shí)間，對(duì)懸液內(nèi)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺滅對(duì)數(shù)值平均值>5.00(表2)。

2.3  消毒現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)表明，濃度為100 mg／L二氧化氯泡騰片溶液對(duì)木質(zhì)的臺(tái)面擦拭消毒，作用30min，各次試驗(yàn)殺滅對(duì)數(shù)值平均值為2.76。使用100mg／L該泡騰片溶液對(duì)織物浸泡消毒，持續(xù)30min，對(duì)金黃色葡萄球菌平均殺滅對(duì)數(shù)為6.27，對(duì)大腸桿菌平均殺滅對(duì)數(shù)值為6.35。
2.4毒理試驗(yàn)結(jié)果
2.4.1急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)多劑量組試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，觀察受試后SPE級(jí)ICR種小鼠，部分劑量出現(xiàn)不安，呆滯，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，呼吸困難和腹部腫脹小鼠，4 h后出現(xiàn)小鼠死亡。LD，o值為4 027 mg／(kg’bw)，可信限2 270～5 590 rag／(kg.bw)，實(shí)際屬于低毒級(jí)。
高應(yīng)用濃度5倍溶液經(jīng)口試驗(yàn)表明，動(dòng)物無(wú)不良反應(yīng)和異常表現(xiàn)。試驗(yàn)期滿對(duì)所有小鼠進(jìn)行解剖，觀察組織無(wú)異常，LD，。>5 000 mg／(kg。bw)。
2.4.2一次完整皮膚刺激試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果表明，有效成分濃度5倍大應(yīng)用濃度的二氧化氯泡騰片溶液動(dòng)物皮膚刺激反應(yīng)積分等于0，為無(wú)刺激性。
3討論
   當(dāng)前二氧化氯國(guó)內(nèi)產(chǎn)品種類眾多，有二元二氧化氯粉劑消毒也有二氧化氯氣體發(fā)生器消毒等使用消毒效果差別較大。該院常規(guī)環(huán)境消毒大量使用84消毒液，存在有殘留，對(duì)環(huán)境危害影響較大以及運(yùn)輸儲(chǔ)存不方便的問(wèn)題。在經(jīng)過(guò)對(duì)比和查找資料后，擬采用二氧化氯泡騰片進(jìn)行常規(guī)衛(wèi)生消毒和衣物消毒使用。經(jīng)測(cè)試選用的二氧化氯泡騰片后發(fā)現(xiàn)，泡騰分解速度快，無(wú)需活化，使用方便，以大使用濃度100mg／L計(jì)算，一片即可配制1000ml，一瓶共計(jì)100片，大大減少消毒過(guò)程出儲(chǔ)運(yùn)的負(fù)擔(dān)。理化性質(zhì)，消毒水平等均達(dá)到預(yù)期效果。100mg／L樣品溶液呈淡黃色透明溶液，在此較低濃度就可以對(duì)物體表面以及織物細(xì)菌有較強(qiáng)的殺滅作用。使用一段時(shí)間后，使用方便的特性和去除異味的性質(zhì)也有良好的體現(xiàn)。毒性低，對(duì)環(huán)境影響小是二氧化氯的重要特點(diǎn)。在醫(yī)院消毒使用過(guò)程中，可有效減少因常規(guī)消毒流程對(duì)空氣環(huán)境，地面環(huán)境等造成的污染。
    在實(shí)際使用過(guò)程中，泡騰配制的二氧化氯溶液，儲(chǔ)存在棕色玻璃瓶中可有效儲(chǔ)存1d，長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存易造成含量下降，所以好現(xiàn)用現(xiàn)配。二氧化氯泡騰片放置在常溫常態(tài)下，4h內(nèi)即可吸潮自行分解，所以在開蓋啟封使用過(guò)程中，要及時(shí)關(guān)閉瓶蓋，開啟后盡快使用。